树突状细胞的发现与培养历程

1973年：树突状细胞的首次鉴定

加拿大科学家Ralph M. Steinman在美国洛克菲勒大学工作期间，首次从小鼠外周淋巴器官（脾、淋巴结和派氏集合淋巴结）中鉴定出了树突状细胞（Dendritic Cells, DC），这一重要发现为他赢得了2011年诺贝尔生理学或医学奖。

1992年：小鼠DC的体外诱导

日本京都大学的Inaba成功在添加GM-CSF（粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子）的情况下，从小鼠血液和骨髓细胞中诱导出大量DC。因此，Inaba被誉为小鼠DC体外培养的开创者，其方法被称为小鼠BMDC培养的经典方式。这些研究是在Ralph M. Steinman的指导下完成的，采用了抗体+补体法去除了骨髓中的淋巴细胞，以避免其对BMDC培养的干扰。同时，在诱导分化过程中，Inaba通过定期轻摇培养板和更换培养液来去除干扰的粒细胞。

1994年：GM-CSF与IL-4的联合诱导

奥地利因斯布鲁克大学的Romani等研究发现，联合使用GM-CSF和IL-4能够从人血液中的PBMC（外周血单个核细胞）中制备出大量的DC。这一发现为DC的培养开拓了新的方向，后续的研究也将IL-4引入了小鼠BMDC的培养中。

1999年：未成熟与成熟DC的特征研究

德国明斯特大学的Labeur团队发现，仅使用GM-CSF诱导的小鼠BMDC为未成熟DC，而结合GM-CSF与IL-4的培养方式生成的BMDC则处于中等成熟度，通过加入CD40L或LPS能够进一步完成成熟，使其成为成熟DC（mature DC, mDC）。

1999年：BMDC培养方法的创新

德国埃尔朗根大学的Lutz提出了一种高效的BMDC获取方法，能够从单只小鼠获得高达1-3x10⁸个DC，数量是Inaba经典方法的50倍。该方法被广泛应用于DC研究中，创新之处在于不对骨髓进行预处理，使用细菌培养皿替代细胞培养板，并在培养过程中延长了培养时间。

2002年：超大量BMDC的开发

美国匹兹堡癌症研究院大学的Son提出了一种新的超大量BMDC培养方法，也被称为bulk-culture method。该方法的每只小鼠可获得的BMDC数量为3–4x10⁷，是Inaba经典方法的7-10倍，且仅需7天的培养时间，体现了效率与实用性的结合。

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